Uracil-DNA Glykosyláza
Uracil-DNA glykosyláza (UDG, UNG) katalyzuje hydrolýzu N-glykosylové vazby mezi uracilem a cukrem v DNA a zabraňuje přenosu DNA v PCR reakcích.
Detailní popis
Uracil-DNA glykosyláza (UDG, UNG) výrobce Thermo Scientific katalyzuje hydrolýzu N-glykosylové vazby mezi uracilem a cukrem, čímž vzniká apyrimidinové místo v jednořetězcové nebo dvouřetězcové DNA obsahující uracil (viz Obrázek 1 v doplňujících udajích). Enzym nevykazuje žádnou aktivitu na RNA (viz Odkaz 1).
Důležité informace
- Aktivní v pufrech Thermo Scientific pro restrikční enzymy a termofilní polymerázy.
Aplikace
- Kontrola přenosu kontaminace při PCR (viz Odkaz 2)
- Detekce jednonukleotidového polymorfismu zprostředkovaná glykosylázou (GMPD) (viz Odkaz 3)
- Místně řízená mutageneze (viz Odkaz 4)
- Jako sonda pro studium interakcí DNA s proteiny (viz Odkaz 5)
- Genotypování SNP
- Klonování produktů PCR (viz odkaz 6)
- Generování jednovláknových převisů produktů PCR a cDNA
Poznámky
Abazická místa v DNA vytvořená uracil-DNA glykosylázou mohou být následně štěpena teplem, alkalickým ošetřením nebo endonukleázami, které štěpí specificky abazická místa. UDG (UNG) je aktivní v přítomnosti nebo nepřítomnosti dvojmocných kationtů.
Použití tohoto enzymu v určitých aplikacích může být předmětem patentů a může vyžadovat licenci.
| 10X reakční pufr | 200 mM Tris-HCl (pH 8.2 at 25°C), 10 mM EDTA, 100 mM NaCl |
| Název kategorie | |
| Koncentrace | 1 U/µL |
| Definice jednotky aktivity | Jedna jednotka enzymu katalyzuje uvolnění 1 nm uracilu z DNA templátu obsahujícího uracil za 60 min při 37 °C. |
| Nebezpečné | Ne |
| Nebezpečné | Ne |
| Inaktivace | Inaktivuje se zahřátím na 95 °C po dobu 10 min. Aktivita enzymu se částečně obnoví při teplotách nižších než 55 °C. Proto produkty PCR po PCR uložte na led a načtěte přímo na gel. |
| Inhibice | Inhibitory: Ugi protein z fága Bacillus subtilis PBS2, protein p56 z fága Bacillus subtilis phi29 (viz odkaz 7). |
| Molekulová hmotnost | 25,6 kDa hmotnost monomeru |
| Kontrola kvality | Nepřítomnost endo-, exodeoxyribonukleáz, fosfatáz a ribonukleáz potvrzená příslušnými testy kvality. |
| Doba použitelnosti | |
| Přepravní podmínky | |
| Informace o přepravě | |
| Zdroj | buňky E. coli K12 |
| SpecifikaceNázev | |
| SpecifikaceHodnota | |
| Skladovací pufr | Enzym se dodává v 30 mM Tris-HCl (pH 7,5), 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,05% (v/v) Tween 20 a 50% (v/v) glycerolu. |
| Podmínky skladování | -20 C |
| Podmínky skladování | -20 C |
Hodnocení produktu
Produkt zatím nikdo nehodnotil, buďte první!