Tento e-shop využívá cookies

Na našich webových stránkách používáme soubory cookies. Některé z nich jsou nezbytné, zatímco jiné nám pomáhají vylepšit tento web a váš uživatelský zážitek. Souhlasíte s používáním všech cookies?

Cookies nastavení

Vaše soukromí je důležité. Můžete si vybrat nastavení cookies níže.

SampleIN™ Direct PCR Kit

Kód produktu: DPK0105 Kód výrobce: DPK0105 Kód dodavatele: {86C42D19-03B8-4C5F-8235-8AAEF42EA3F6} Výrobce: highQu GmbH professionally simple
-4 %
Ušetříte
531,19 Kč
14 342,13 Kč
13 810,94 Kč
11 414,00 Kč bez DPH
do týdne
400

SampleIN™ Direct PCR Kit je prémiový nástroj pro rychlou přímou PCR, která eliminuje potřebu zdlouhavého čištění templátu.

Zobraz detailní popis

Detailní popis

Kit je vynikající pro přímou PCR z myšího ocasu nebo ucha, savčích tkání, vlasového folikulu, bukálních výtěrů a krve.
Rychlá 15minutová extrakce DNA pomocí DPK Lysis a proteázových pufrů v jedné zkumavce vytváří PCR templátový extrakt, který je dále amplifikován za podmínek rychlého cyklování s hot-start Taq master mixem, který obsahuje červené barvivo pro přímé nanášení gelu.
Ve 2% agarózovém TAE gelu migruje červené barvivo s~350 bp DNA, v 1% agarózovém TAE gelu s~600 bp DNA fragmenty.
ALLin™ HS Red Taq Mastermix obsahuje Taq DNA polymerázu s horkým startem, která zajišťuje vysoký výtěžek, specifickou amplifikaci s nízkým pozadím. Komponenty mixu umožňují rychlé cyklování PCR a zvyšují úspěšnost při práci s komplexními šablonami nebo multiplexováním. Generované A-tailed PCR produkty jsou vhodné pro ligaci do TA klonovacích vektorů, sekvenování a další aplikace.

Sample Guidelines

 

Sample amounts can be slightly increased for better yields, but too much material may cause inefficient lysis and PCR inhibition.

Sample (fresh or frozen) Amount Extraction vol.
Mouse tail 2 mm or 3-5 mg 100 µl
Mouse ear 2 mm2 or 3-5 mg 100 µl
Mammalian tissue 5 mg 100 µl
FFPE Tissue 2 mm2 of 10 µm section 100 µl
Blood (fresh/EDTA) 2 µl 100 µl
Blood Guthrie cards 2 mm2 100 µl
Blood FTA/FTA Elute cards 2 mm2 100 µl
Hair follicle 2 follicles 100 µl
Buccal swab 1 swab 300 µl
 
Sample extraction procedure:
  • Take typical measures to prevent contamination, keep your bench clean, wear gloves, and use sterile tubes.
  • Thaw DPK Buffers at room temperature. Mix well before use.
  • Prepare a 100 µl extraction reaction in a sterile vial (use 3x larger volumes of all reagents for buccal swab):

 

Sample As indicated above in SAMPLE GUDELINES
DPK Lysis Buffer, 5X 20 μl
DPK Protease Buffer, 10X 10 μl
PCR Water (not supplied) 70 μl
  • Mix very gently. Place into the thermal block/water bath set like:
Lysis 75°C - 5 min. Vortex twice during lysis.
Protease inactivation 95°C - 10 min

 

  • Add 900 µl of PCR Water. Centrifuge 1 min to pellet cell debris.
  • Remove supernatant into the sterile tube.
  • Store it at -20°C for several months or use immediately for PCR.
 
Perform PCR reaction:

 

  • Include a no-template control and positive control in parallel.
  • Thaw and keep PCR reagents on ice. Mix well before use.

 

Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤ 2 µl of 10 µM)
Template 1-5 µl of extraction supernatant
PCR Water to 25 μl
ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X (also available separately) 25 µl

Mix gently. Place into the PCR instrument set like:

Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 15 sec/kb
(90 sec for multiplex)

 

  • In a 2% agarose TAE gel the red dye migrates with~350 bp DNA, in 1% agarose TAE gel with ~ 600 bp DNA fragments.
  • Store probes for short time on ice, for long at -20°C.

Hodnocení produktu

Produkt zatím nikdo nehodnotil, buďte první!