µ-Proteofection Kit VI - Mikrofektions Kit

Detailní popis

Nejdůležitější:

     Možnost okamžitého živého pozorování
     Ideální optické vlastnosti pro procházející světlo a fluorescenční mikroskopii
     Optimální vitalita buněk
     Plná kompatibilita séra
     Vizualizace procesu transfekce v živých buňkách
     Efektivní, rychlý protokol
     Buňky lze fixovat a barvit
     Kompatibilní s olejovou imerzí

μ-Proteofection Kit VI, vyvinutá speciálně pro proteofekci, je unikátní kombinací μ-Slides VI od ibidi GmbH a PROTEOfectene® od Biontex. Vysoce výkonná souprava umožňuje pozorování živých chráněných buněk pod mikroskopem s vysokým rozlišením.

V ultra jednoduchém protokolu jsou adherentní buňky ošetřeny v μ-Slide proteoplexy vytvořenými z PROTEOfectene® a odpovídajícím proteinem a následně mohou být přímo pozorovány ve vynikající optické kvalitě. Příklady aplikací zahrnují sledování postupu fluorescenčně značeného proteinu buňkou od endocytózy do místa jejího působení.

Proteofekce fúzních proteinů pomocí PROTEOfectene®

PROTEOfectene® se používá k zavedení fúzního proteinu do buněčného cytosolu pomocí proteofekce. Nukleární lokalizační sekvence fúzního proteinu je identifikována importiny a aktivně transportována přes jaderné póry do jádra – proces, který lze pozorovat pomocí fluorescenční mikroskopie.

Proteofekce buněk HeLa proteinem GST-NLS-GFP a PROTEOfectene®; obrázky jasně ukazují koncentraci fluorescenčního proteinu v buněčném jádře sousedící s volnými proteoplexy a proteoplexy vychytávanými endocytózou (vychytávání 20 h po přidání proteoplexu).

Příkladem účinnosti proteofekce je zavedení fúzního proteinu GST-NLS-GFP a následný jaderný transport aktivního proteinu. Obsahuje tři domény: GST (Glutathion-S-transferáza) je doména značky sloužící k čištění proteinu po expresi. NLS (nukleární lokalizační signál) je krátká sekvence aminokyselin, která slouží k transportu celého proteinu přes jaderné póry. GFP (Green Fluorescent Protein) konečně umožňuje vizualizaci procesu díky své fluorescenci v zeleném pásmu elektromagnetického spektra.

Komplex importinu-α a NLS sekvence nukleoplasminu žáby Xenopus [1]
Literature:
[1] E. Conti, J. Kuriyan; Structure Fold. Des. v8, 329 – 338 (2000) [PubMed ID: 10745017]

Protefekce buněk Hep G2 pomocí R-fykoerythrinu

Proteofekce buněk Hep G2 pomocí µ-Proteofection Kit VI. Snímky byly zaznamenány 24 hodin po přidání komplexu PROTEOfectene/R-fykoerythrin:

Obrázek buněk

Fluorescenční obrázek:
Většina jasných skvrn jsou buněčné fragmenty nabité R-fykoerythrinem. Všimněte si fluorescenčních cytoplazmat a neluminózních buněčných jader.

Proteofekce buněk HeLa proteinem GST-NLS-GFP

Proteofekce buněk HeLa pomocí µ-Proteofection Kit VI. Obrázky byly zaznamenány 24 hodin po přidání komplexu PROTEOfectene/GST-NLS-GFP.

Obrázek buněk

Fluorescenční obrázek:
Přesuňte kurzor na obrázek pro zobrazení překryvného obrázku: Buněčná jádra kvantitativně importovala protein NLS-GFP.

Specifikace produktu
Aplikace Proteofekce a mikroskopie s vysokým rozlišením živých savčích buněk (zobrazování živých buněk)
Obsah PROTEOfectene®, R-Phycoerythrin jako pozitivní kontrola, µ-Slides VI (každý 6 kanálů)
Testy 90 za sadu
Doprava Při pokojové teplotě
Skladování 4°C
Skladovatelnost 1/2 roku (po datu dodání)
Mikrofekce skupiny produktů