phi29 DNA Polymerase
Rekombinantní DNA polymeráza phi29 je klasický enzym určený pro použití v běžných aplikacích izotermické amplifikace DNA, které se provádějí při mírné teplotě na základě aktivity vytěsňování vláken.
Detailní popis
Enzym je dodáván s optimalizovaným vysoce účinným pufrem. Uživatel musí přidat dNTP, templát a primery. phi29 DNA Polymerase byla objevena a charakterizována M. Salasem.
Polymeráza má silnou aktivitu vytěsňování vláken a účinnou 5'-3' polymerázovou aktivitu, pracuje při teplotě přibližně 4-35 °C a syntetizuje DNA z nepatrného množství až po enormní výtěžek až po viditelně zvýšenou viskozitu reakční směsi.
Enzym nemá 5'-3' exonukleázovou aktivitu, ale má silnou 3' - 5' exonukleázovou (korekturní) aktivitu a může degradovat primery, proto se v literatuře doporučuje používat 3' chráněné exo-rezistentní primery. Enzym lze tepelně inaktivovat, toleruje dUTP a vytváří DNA s tupým koncem.
Nejdůležitější technické vlastnosti DNA polymerázy phi29 (na základě hojně dostupné odborné literatury):
Silná aktivita vytěsňování vláken
5'-3' polymerázová aktivita na DNA templátech (a na RNA templátech)
Silná 3' - 5' (korekturní) exonukleázová aktivita, může degradovat nechráněné primery
Žádná 5' - 3' exonukleázová aktivita
Optimální reakční teplota je 30 °C
Rozsah pracovních teplot je 4-35 °C, závisí na aplikaci
Optimální reakční doba závisí na aplikaci
Enzym je inaktivován za 10 minut při 65 °C.
Může prodlužovat DNA i RNA primery
Přidání pyrofosfatázy může reakci urychlit
Použití tohoto produktu v určitých aplikacích, některých přísadách nebo protokolech může být předmětem patentů. Uživatel musí analyzovat všechny příslušné licence pro omezené použití na etiketě a v některých případech může potřebovat licenci.
Hodnocení produktu
Produkt zatím nikdo nehodnotil, buďte první!