Nukleotidy a priméry

V molekulární biologii se nukleotidy využívají jako základní stavební kameny pro in vitro syntézu DNA nebo RNA. Za nukleotidy můžeme považovat základní jednotky molekul nukleových kyselin. Liší se obsahem dusíkatých bází a schopností tvořit vodíkové vazby. Krátké sekvence nukleotidů můžete použít jako priméry, tedy startovní místo pro polymerázy. Využijete je i jako sondy pro vyhledání komplementárních úseků v analyzované DNA. Priméry můžete zakoupit již validované, funkčně ověřené výrobcem. 


Probíhá načítání komponenty
dNTP Mix, 10 mM each

dNTP Mix, 10 mM each

do týdne
3 025,00 Kč
2 500,00 Kč bez DPH
1 mL
dNTP mixes – premixed aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP, and dGTP.
Oligo(dT)18 Primer

Oligo(dT)18 Primer

do týdne
2 565,20 Kč
2 120,00 Kč bez DPH
120 µL
Random Hexamer Primer, Oligo(dT)18 Primer, Anchored Oligo dT Primer
dNTP Set, 100 mM Solutions

dNTP Set, 100 mM Solutions

do týdne
3 751,00 Kč
3 100,00 Kč bez DPH
4x0,25 ml
dNTP set – aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP and dGTP supplied in separate ...
Exonuclease I

Exonuclease I

do týdne
2 686,20 Kč
2 220,00 Kč bez DPH
4000 Units
Exonuclease I (ExoI) degrades single-stranded DNA in a 3'→5' direction, rel...
dNTP Mix, 10 mM each

dNTP Mix, 10 mM each

do týdne
810,70 Kč
670,00 Kč bez DPH
0.2 ml
dNTP mixes – premixed aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP, and dGTP
dNTP Mix, 2 mM each

dNTP Mix, 2 mM each

do týdne
3 073,40 Kč
2 540,00 Kč bez DPH
dNTP mixes – premixed aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP, and dGTP.
Exonuclease I

Exonuclease I

do týdne
10 744,80 Kč
8 880,00 Kč bez DPH
20000 Unit
Exonuclease I (ExoI) degrades single-stranded DNA in a 3'→5' directio...
RNase A, DNase and protease-free

RNase A, DNase and protease-free

do týdne
1 447,16 Kč
1 196,00 Kč bez DPH
10 mg
RNase A is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA at...
dNTP Set, 100 mM Solutions

dNTP Set, 100 mM Solutions

do týdne
11 495,00 Kč
9 500,00 Kč bez DPH
4x1 ml
dNTP set – aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP and dGTP supplied in separate ...
Lambda DNA

Lambda DNA

do týdne
1 703,68 Kč
1 408,00 Kč bez DPH
500 µg
Lambda DNA is a common substrate for restriction endonucleases and for generati...
DNase I, RNase-free (supplied with MnCl2)

DNase I, RNase-free (supplied with MnCl2...

do týdne
1 979,56 Kč
1 636,00 Kč bez DPH
1000 units
An endonuclease that nonspecifically cleaves single- and double-stranded DNA to rele...
dsDNase

dsDNase

do týdne
3 666,30 Kč
3 030,00 Kč bez DPH
50 rxns
dsDNase is a heat inactivatable recombinant shrimp DNase used to remove genomic...

Nukleotidy a priméryPro návrh specifické sekvence primérů, kódujícího a antikódujícího priméru využijete řadu webových programů. Doporučujeme například PrimerExpress nebo Primer3. Ideálně by měly primery být jedinečné pro cílovou sekvenci a vykazovat malou pravděpodobnost vzniku dimerů, nespecifickou hybridizaci a neměly by generovat pozitivní falešné výsledky.

Podrobně o nukleotidech

Meziřetězcové vodíkové vazby mezi bázemi vznikají podle pravidla párování A-T, C-G. Pro vznik dvouřetězcové molekuly je typické antiparalelní uložení řetězců. Vodíkové vazby lze zrušit zvýšením teploty nad 900 °C, iontovou silou a změnou pH. Po návratu k původním hodnotám se vodíkové vazby znovu vytvoří.

Při nakupování primérů se řiďte několika obecnými zásadami, abyste zajistili účinnou a specifickou amplifikaci. Délka primérů by měla být 15 až 25 nukleotidů. Vyhněte se umístění více než dvou nukleotidů G nebo C v posledních pěti nukleotidech na 3'-konci. Tím snížíte riziko nespecifického nasednutí primérů. Další zásady a informace o nukleotidech a primérech se dozvíte na webu Biogen v našem článku.