Nukleotidy a priméry

V molekulární biologii se nukleotidy využívají jako základní stavební kameny pro in vitro syntézu DNA nebo RNA. Za nukleotidy můžeme považovat základní jednotky molekul nukleových kyselin. Liší se obsahem dusíkatých bází a schopností tvořit vodíkové vazby. Krátké sekvence nukleotidů můžete použít jako priméry, tedy startovní místo pro polymerázy. Využijete je i jako sondy pro vyhledání komplementárních úseků v analyzované DNA. Priméry můžete zakoupit již validované, funkčně ověřené výrobcem. 


Probíhá načítání komponenty
T4 DNA Ligase

T4 DNA Ligase

Skladem
na dotaz
80000CE un
400 Weiss units (80000 CE units)
dNTP Mix, 2 mM each

dNTP Mix, 2 mM each

do týdne
805,86 Kč
666,00 Kč bez DPH
1 mL
dNTP mixes – premixed aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP, and dGTP.
dNTP Mix, 10 mM each

dNTP Mix, 10 mM each

do týdne
810,70 Kč
670,00 Kč bez DPH
0.2 ml
dNTP mixes – premixed aqueous solutions of dATP, dTTP, dCTP, and dGTP
dNTP/dUTP Mix

dNTP/dUTP Mix

do týdne
813,12 Kč
672,00 Kč bez DPH
1 mL
dNTP/dUTP Mix is an aqueous solution containing dATP, dCTP, dGTP, each at a fin...
ATP, 100 mM Solution

ATP, 100 mM Solution

do týdne
1 105,94 Kč
914,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C10H13N5O13P3Na3, Molecular weight: 573.1 (acid form: 507.2) ATP is hig...
UTP, 100 mM Solution

UTP, 100 mM Solution

do týdne
1 108,36 Kč
916,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C11H15N5O12P3Na3, MW: 573.2 (acid form: 507.2) UTP is a highly stable ...
CTP, 100 mM Solution

CTP, 100 mM Solution

do týdne
1 108,36 Kč
916,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C9H13N3O14P3Na3, Molecular weight: 549.1 (acid form: 483.1) CTP is a h...
GTP, 100 mM Solution

GTP, 100 mM Solution

do týdne
1 108,36 Kč
916,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C10H13N5O14P3Na3, Molecular weight: 589.2 (acid form: 523.2) GTP is highly ...
UTP, Tris buffered

UTP, Tris buffered

do týdne
1 159,18 Kč
958,00 Kč bez DPH
0.25 ml
. Formula: C9H15N2O15P3·3 C4H11NO3, molecular weight: 847.5 (acid form: 484.1...
CTP, Tris buffered

CTP, Tris buffered

do týdne
1 166,44 Kč
964,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C9H16N3O14P3·3 C4H11NO3, molecular weight: 858.6 (acid form: 483.3) ...
ATP, Tris buffered

ATP, Tris buffered

do týdne
1 188,22 Kč
982,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C10H16N5O13P3·3 C4H11NO3, molecular weight: 870.6 (acid form: 507.2) ...
GTP, Tris buffered

GTP, Tris buffered

do týdne
1 195,48 Kč
988,00 Kč bez DPH
0.25 ml
Formula: C10H16N5O14P3·3 C4H11NO3, molecular weight: 898.6 (acid form: 523.2) ...

Nukleotidy a priméryPro návrh specifické sekvence primérů, kódujícího a antikódujícího priméru využijete řadu webových programů. Doporučujeme například PrimerExpress nebo Primer3. Ideálně by měly primery být jedinečné pro cílovou sekvenci a vykazovat malou pravděpodobnost vzniku dimerů, nespecifickou hybridizaci a neměly by generovat pozitivní falešné výsledky.

Podrobně o nukleotidech

Meziřetězcové vodíkové vazby mezi bázemi vznikají podle pravidla párování A-T, C-G. Pro vznik dvouřetězcové molekuly je typické antiparalelní uložení řetězců. Vodíkové vazby lze zrušit zvýšením teploty nad 900 °C, iontovou silou a změnou pH. Po návratu k původním hodnotám se vodíkové vazby znovu vytvoří.

Při nakupování primérů se řiďte několika obecnými zásadami, abyste zajistili účinnou a specifickou amplifikaci. Délka primérů by měla být 15 až 25 nukleotidů. Vyhněte se umístění více než dvou nukleotidů G nebo C v posledních pěti nukleotidech na 3'-konci. Tím snížíte riziko nespecifického nasednutí primérů. Další zásady a informace o nukleotidech a primérech se dozvíte na webu Biogen v našem článku.